Responder:
GAPDH se utiliza a menudo como un control de carga.
Explicación:
En la transferencia de Western a menudo usamos GAPDH como control de carga. Lo que esto significa es que al sondear el GAPDH podemos verificar que tenemos una cantidad equivalente de proteínas cargadas en diferentes carriles de la transferencia.
Un ejemplo de uso: supongamos que tenemos una enfermedad que creemos que causa una elevación de una proteína particular en la célula. Haríamos una muestra de células "sanas" y otra de células "enfermas". Luego cargaríamos cantidades de proteína equivalentes de ambas muestras en un gel para la transferencia Western.
Después de explorar la transferencia de nuestra proteína de interés, encontramos que en las células enfermas el nivel de proteína está efectivamente elevado (es decir, se produce una banda más oscura en la transferencia). Para probar que este aumento en la proteína se debe a un cambio en la expresión de la célula, en lugar de un artefacto de carga (es decir, la banda de más instensión es causada por un cambio en la expresión de la proteína en las células, y no por la carga accidental de más proteína). de la muestra de "enfermedad" que de la "sana") también probaríamos la transferencia de GAPDH para mostrar que los niveles totales de proteínas son los mismos en ambos carriles.
Por lo tanto, al hacer esto, estamos demostrando que se ha cargado una proteína equivalente en los dos carriles y que el cambio en la intensidad de la banda que estamos observando se debe a cambios en la expresión de la proteína para la proteína de interés.
¿Por qué se utiliza el cargo formal? + Ejemplo
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¿Por qué se utiliza Western Blot para confirmar Elisa? + Ejemplo
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¿Qué es un cariotipo y para qué se utiliza? + Ejemplo
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